Nb2-11細胞(小鼠淋巴瘤細胞)注意事項:
1. 收到細胞后首先調(diào)查細胞瓶是否無缺,培育液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和咱們聯(lián)絡(luò)。
2. 先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培育箱靜置數(shù)小時4h左右,安穩(wěn)細胞狀況,切忌在溫箱內(nèi)靜置過夜。
3. 靜置后鏡檢,拍照,記載細胞狀況。主張傳代后也拍照記載細胞成長情況。
4. 貼壁細胞:若細胞密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,收集細胞瓶內(nèi)的培育基,留8ml持續(xù)培育至80%左右再傳代,瓶蓋可稍微擰松。
5. 細胞瓶內(nèi)的培育基含血清和雙抗,可收集后4℃保存?zhèn)溆茫裳a加2%血清。剛開始傳代時主張一半用細胞瓶內(nèi)的培育基,一半用客戶自備的培育基,使細胞逐步適應(yīng)培育條件,以免因不適應(yīng)而形成成長狀況欠安。
6. 細胞胰酶消化液主張運用PBS配制,
7. 因為細胞培育過程外因太多,所以咱們的售后保障期為一周,超過一周的細胞咱們會酌情處理,但不提供免費替換服務(wù)。 細胞運送和保存:可選擇干冰運送及發(fā)送復(fù)蘇存方式:1干冰運送,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;收到后應(yīng)持續(xù)成長,傳代達到細胞成長狀況良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培育過程。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培育,而不適用于懸浮細胞培育,懸浮細胞可運用滴片法;
2.所運用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃制作,并通過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片十分薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.假如需要更多成長狀況共同的細胞,可以運用較大的培育皿,但不宜過大,以避免培育液的浪費和添加污染機率;
5.假如細胞貼壁成長才能較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然曬干。
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