為幫忙我們了解ELISA試劑盒所需求樣本處理及要求,ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗中要害的一步,稍有不小心將導致試驗滿盤皆輸,怎么安全,方便的處理樣本。
我司何做出了以下的分析:
1. 安排標本:切開標本后,稱取重量。參與一定量的PBS,PH7.4。用液氮敏捷冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后依然堅?-8℃的溫度。參與一定量的PBS(PH7.4),用手藝或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心收集上清。分裝后一份待檢測,其他冷凍備用。
2. 血清:室溫血液天然凝聚10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心收集上清,保存過程中如出現(xiàn)堆積,應再次離心。操作過程中防止任何細胞影響。運用不含熱原和內毒素的試管。
3. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右 (2000-3000轉/分)去除顆粒。細心收集上清,保存過程中如有堆積構成,應該再次離心。
4. 標本收集后盡早進行提?。?/strong>提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行試驗。若不能立刻進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應防止重復凍融.
5. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心收集上清,保存過程中如有堆積構成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
6. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度到達100萬/ml左右。經過重復凍融,以使細胞損壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心收集上清 。保存過程中如有堆積構成,應再次離心。
7. 不能檢測含NaN3的樣品:因NaN3克制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
ELISA技術的操作要害
杰出的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測作用牢靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構成不同而有所差異,國內醫(yī)學查驗一般均用板式點.本文將敘說板式留意要害,要具體的運用說明,嚴峻遵循規(guī)矩操作,必能得出的作用.
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