ELISA試劑盒中抗體有包被抗體和酶標抗體,這兩種抗體是一種抗體,前者沒有酶標,后者用酶進行了符號. NCM-ELISA一般有一抗和二抗,這兩種抗體不一樣,前者(一抗)一般是鼠抗體或兔抗體,沒有酶標,相對應的二抗一般是羊抗鼠或羊抗兔抗體,用酶進行符號.也有用馬大規(guī)模備抗體的.
確保ELISA試劑盒安全性的方法:
1.防止直接觸摸終止液和底物A、B。一旦觸摸到這些液體,請趕快用水沖洗。
2.試驗中不要吃喝、抽煙或運用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
ELISA試劑盒的樣品收集、處理及保存方法:
1.血清-----操作過程中防止任何細胞影響。運用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地別離。
2.血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3.細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.安排勻漿-----將安排參加適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5.保存------假如樣品不當即運用,應將其分成小部分-70 ℃保存,防止反復冷凍。盡可能的不要運用溶血或高血脂血。假如血清中很多顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍結(jié)。應在室溫下凍結(jié)并確保樣品均勻地充沛凍結(jié)。
ELISA試劑盒的操作注意事項:
1.試劑應按標簽說明書儲存,運用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟掉,不行保存。
2.試驗中不必的板條應當即放回包裝袋中,密封保存,防止蛻變。
3.不必的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前運用。
4.運用一次性的吸頭防止交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,防止運用帶金屬部分的加樣器。
5.運用干凈的塑料容器配置洗滌液。運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反響孔中吸水。
TDS-ELISA是三抗體ELISA,第三級的抗體是將信號級聯(lián)放大. 以上三種是比較常見的,還有其他一些試劑盒,可參考免疫學的內(nèi)容.
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