實(shí)驗(yàn)看似簡(jiǎn)略,其實(shí)不然。記得以前一個(gè)同學(xué)*次做ELISA試驗(yàn),跟我說,ELISA試驗(yàn)幾乎太簡(jiǎn)略了,到第2次在次做ELISA試驗(yàn)的時(shí)分,他驚訝了,說成果不同怎樣這么大(同一份標(biāo)本),第三次的時(shí)分,他決議認(rèn)真的做一次,爭(zhēng)奪做到同一份標(biāo)本,這次讓他感受到ELISA并不是那么簡(jiǎn)略,發(fā)覺其實(shí)挺難的。今日的文章中為我們講述一些ELISA試驗(yàn)中的小技巧,希望對(duì)我們有所協(xié)助!
1.操作前應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充沛的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反響孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確運(yùn)用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,防止刮擦包被板底部。加樣過程中防止液體外濺,血清殘留在反響孔壁上,加樣器吸頭要清洗潔凈,防止污染,加樣次序要與說明書共同,否則可導(dǎo)致成果錯(cuò)誤,試驗(yàn)重復(fù)性差。
3.手藝洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗滌次數(shù)不要超越說明書引薦的洗滌次數(shù),洗液在反響孑L內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流,形成孔問污染,導(dǎo)致假陰性或假陽性。
4.要保證加液量共同ELISA試劑盒咱們?cè)谶\(yùn)用時(shí)感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn),形成顯色不統(tǒng)一,判別錯(cuò)誤。
5.顯色液量不行過多加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反響,顯色液量不能過多,避免顯色過強(qiáng)。
ELISA試劑盒的影響要素應(yīng)選用質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,不能圖便宜,忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),在運(yùn)用時(shí)先平衡至室溫,不同批號(hào)的試劑組分不宜穿插運(yùn)用。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完,剩余的試劑下次用時(shí)應(yīng)先查看是否變質(zhì),顯色劑如被污染變色將形成全部顯色,導(dǎo)致錯(cuò)誤成果。
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