ELISA試劑盒在搜集樣本前都有必要有一個(gè)完好的方案,有必要清楚要檢測(cè)的成份是否足夠安穩(wěn)。對(duì)搜集后當(dāng)天就進(jìn)行
檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。關(guān)于隔天再檢測(cè)的樣本小鼠ELISA試劑盒,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)防止重復(fù)凍融。
ELISA試劑盒液體類標(biāo)本: 包含血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培育上清等。
1. 血清:
室溫血液自然凝結(jié)10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
3. 尿液:
用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。ELISA試劑盒保存過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)施。
4. 細(xì)胞培育上清:
檢測(cè)排泄性的成份時(shí),用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。
5. 培育細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度到達(dá)100萬/ml左右。經(jīng)過重復(fù)凍融或參加安排蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
6. 安排標(biāo)本
ELISA試劑盒切開標(biāo)本后,稱取分量。參加一定量的PBS,PH7.4。ELISA試劑盒用液氮敏捷冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本消融后依然堅(jiān)持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS(PH7.4),或安排蛋白萃取ELISA試劑盒, 用手藝或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢測(cè),其他冷凍備用。
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