ELISA試劑盒利用此抗體作為試劑就可檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原,因此免疫測(cè)定的應(yīng)用范圍極廣,在臨床檢驗(yàn)中可用于測(cè)定:
1) 體液中的各種蛋白質(zhì),包括含量極少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等。
2) 激素,包括小分子量的甾體激素等。
3) 抗生素和藥物。
4) 病原體抗原,HBsAg、HBeAg等。
5) 另外,也可利用純化的抗原檢測(cè)標(biāo)本中的抗體,例如抗-HBs等。
5.標(biāo)記的免疫測(cè)定
如上所述,免疫測(cè)定是一種很敏感的測(cè)定方法,抗原抗體反應(yīng)后直接測(cè)定形成的沉淀或濁度,敏感度可達(dá)5~10μg/ml,但在臨床檢驗(yàn)中,某些待測(cè)物在標(biāo)本中的含量遠(yuǎn)低于這一水平,因此要尋找增加敏感度的方法。標(biāo)記的免疫測(cè)定是將檢測(cè)試劑中的抗原或抗體用可微量測(cè)定的物質(zhì)加以標(biāo)記,通過(guò)測(cè)定標(biāo)記物來(lái)提高敏感度。在放射免疫測(cè)定和中,ELISA試劑盒標(biāo)記物分別為放射性核素和酶,ELISA試劑盒zui后用測(cè)定放射性和酶活力來(lái)計(jì)算待檢物的量,敏感度可比直接測(cè)定沉淀物提高數(shù)百至數(shù)千倍。在標(biāo)記免疫測(cè)定中,一般加入過(guò)量的標(biāo)記試劑以保證與待測(cè)物*反應(yīng)
在反應(yīng)產(chǎn)物中有與Ag結(jié)合的Ab※和游離和Ab※ ,如不將兩者分離而測(cè)定標(biāo)記物,測(cè)得的結(jié)果將為兩者之和。因此,游離標(biāo)記物與結(jié)合標(biāo)記物的分離是標(biāo)記免疫測(cè)定中的重要步驟??刹捎枚喾N手段,固相載體是其中之一。如將抗原或抗體包被在固相載體上,然后再與標(biāo)記的抗原或抗體直接反應(yīng),結(jié)合的標(biāo)記物被固定在載體上,而游離的標(biāo)記物留于溶液中。這樣可以通過(guò)洗滌將游離的Ab※除去,結(jié)合標(biāo)記物的測(cè)定可在固相上進(jìn)行。IgM抗體一般為保護(hù)性抗體具有免疫性。因此IgM抗體的測(cè)定,對(duì)某些傳染病如甲型肝炎有較高的臨床診斷價(jià)值。
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