1. 產(chǎn)品有哪幾種規(guī)格?可檢測(cè)多少個(gè)樣本?
ELISA試劑盒產(chǎn)品分為48T和96T兩種規(guī)格。
每次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線一般設(shè)7個(gè)不同濃度,加上空白孔,標(biāo)準(zhǔn)曲線一共需要8個(gè)孔。因此,一個(gè)48T試劑盒zui多可以測(cè)定40個(gè)樣本(不做重復(fù)且一次用完),一個(gè)96T試劑盒zui多可以測(cè)定88個(gè)樣本(不做重復(fù)且一次用完)??梢愿鶕?jù)實(shí)際樣本數(shù)量和實(shí)驗(yàn)計(jì)劃選擇合適的產(chǎn)品規(guī)格。
2.48T和96T的試劑盒有哪些不同?
48T和96T的試劑盒,每個(gè)孔的反應(yīng)體系都是*一樣的。不同的是試劑盒中各組分的規(guī)格,詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。
3. 產(chǎn)品的穩(wěn)定性如何?
產(chǎn)品在研發(fā)前期已通過(guò)嚴(yán)格的穩(wěn)定測(cè)試,發(fā)貨前亦須通過(guò)檢測(cè)并提供質(zhì)檢報(bào)告,在市場(chǎng)上深受廣大客戶(hù)的贊許!
4.貴公司有沒(méi)有酶活性檢測(cè)的試劑盒?
酶活力的測(cè)定實(shí)際上就是測(cè)定酶促反應(yīng)的速率。酶活力的大小即酶含量的多少,可以用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶單位來(lái)表示,單位是U/g或U/ml。酶活力的測(cè)定方法:⑴測(cè)定完成一定量反應(yīng)所需的時(shí)間,⑵測(cè)定單位時(shí)間內(nèi)酶催化化學(xué)反應(yīng)量。主要通過(guò)產(chǎn)物的增加量或底物的減少量來(lái)測(cè)定。常用的方法有:⑴分光光度法,⑵熒光法,⑶同位素測(cè)定法,⑷電化學(xué)法。
ELISA的方法一般是對(duì)可溶性抗原或抗體進(jìn)行定性和定量的檢測(cè),所以酶活性是不能用ELISA來(lái)檢測(cè)的。
5.一次ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)需要多長(zhǎng)時(shí)間?
雙抗體夾心ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要4-4.5小時(shí),競(jìng)爭(zhēng)ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要2-2.5小時(shí)。
6.血清樣本如何處理?
全血標(biāo)本于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
7. 血漿樣本如何處理?
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,于1000×g離心15分鐘,仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
8. 尿液樣本如何處理?
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
9.細(xì)胞上清液樣本如何處理?
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右(5000×g)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
10. ELISA試劑盒組織樣本如何處理?
用預(yù)冷的PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織,以去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣本對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
11.為什么有的試劑盒是采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法?
小分子抗原或半抗原因?yàn)槿狈勺鲓A心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定,可以采用競(jìng)爭(zhēng)法。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競(jìng)爭(zhēng)生物素化抗體上的結(jié)合位點(diǎn),標(biāo)本中抗原量含量愈多,結(jié)合在固相上的生物素化抗體愈少,zui后的顯色也愈淺,即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素、藥物等ELISA測(cè)定多用此法。
12.用什么軟件處理ELISA檢測(cè)的數(shù)據(jù)比較好?
ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合可以應(yīng)用Curve Expert軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。它使用非常方便,可以生成漂亮的曲線應(yīng)用到論文之中。軟件可以在下載中心進(jìn)行下載。
13. 試劑盒做的結(jié)果不理想怎么辦?
實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想請(qǐng)及時(shí)與客服或,我們可以幫您一起分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果僅憑實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)無(wú)法判斷,您可以將試劑盒發(fā)回給我們進(jìn)行售后檢測(cè)。如果是試劑盒本身的質(zhì)量問(wèn)題,可以為您退換貨;如果是實(shí)驗(yàn)操作的問(wèn)題,技術(shù)人員可以給您一些改進(jìn)的建議。
14.使用Elabscience ELISA Kit發(fā)表論文有獎(jiǎng)勵(lì)嗎?
如果您使用我公司的ELISA Kit且已發(fā)表論文,可以獲得500~2000元獎(jiǎng)學(xué)金或代金券,具體獎(jiǎng)勵(lì)政策請(qǐng)咨詢(xún)銷(xiāo)售人員。
15.怎樣處理elisa實(shí)驗(yàn)結(jié)果?
1.ELISA實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計(jì)算每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
2.平均OD值減去空白孔的OD值。
3.ELISA試劑盒制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
以減去本底后的OD值為X軸,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來(lái)作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對(duì)數(shù)、對(duì)數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條zui合適的方程。要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù),將對(duì)應(yīng)的OD值帶入該方程,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度,得到的結(jié)果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度zui高的那條曲線。
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