溴化乙錠是強(qiáng)誘變劑,并有中度毒性。取用含有這一染料的溶液時(shí)務(wù)必戴上手套,溶液使用后應(yīng)按下面介紹的方法之一進(jìn)行凈化處理。
1. 溴化乙錠濃溶液(即濃度>0.5mg/ml 的溴化乙錠溶液)的凈化處理
方法一:用沙門氏菌-微粒體測(cè)定法表明,本方法可使EB的誘變活性降至原來(lái)的1/200 左右。
(1) 加入足量的水使EB的濃度降低至0.5mg/ml以下。
(2) 在所得的溶液中加入0.2體積的新配制的5%次磷酸和0.12體積的新鮮配置的0.5mol/L亞硝酸鈉,小心混勻。切記:檢測(cè)該溶液的pH值應(yīng)<3.0,市售次磷酸一般為50%溶液,具有腐蝕性,應(yīng)小心操作,必須在臨用前現(xiàn)用現(xiàn)稀釋。亞硝酸鈉溶液(0.5mol/L)的配法:用水溶解34.5g亞硝酸鈉并定容至終體積500ml,現(xiàn)用現(xiàn)配。
(3) 于室溫溫育24小時(shí)后,加入大大過(guò)量的1mol/L碳酸氫鈉,該溶液可予丟棄。
方法二:用沙門氏菌-微粒體測(cè)定法檢查,經(jīng)用本方法處理后,可使EB的誘變活性降低至原來(lái)的1/3000左右。但也有報(bào)告稱,在用凈化溶液處理的空白樣品中,偶爾有一些仍具有誘變活性。
(1) 加入足量的水使EB的濃度降低至0.5mg/ml 以下。
(2) 加入1倍體積的0.5mol/L KMnO4,小心混合后再加入1倍體積的2.5mol/L HCl,小心混勻,于室溫放置數(shù)小時(shí)。
(3) 加入1倍體積的2.5mol/L NaOH,小心混合后可丟棄該溶液。
2. EB稀溶液(如含有0.5μg/ml EB的電泳緩沖液)的凈化處理
方法一
(1) 每100ml溶液中加入2.9g Amberlite XAD-16,這是一種非離子型多聚吸附劑,可向Rohm & Haas公司購(gòu)置。
(2) 于室溫放置12小時(shí),不時(shí)搖動(dòng)。
(3) 用Whatman 1號(hào)濾紙過(guò)濾溶液,丟棄濾液。
(4) 用塑料袋封裝濾紙和Amberlite樹脂,作為有害廢物予以丟棄。
方法二
(1) 每100ml溶液中加100mg粉狀活性炭。
(2) 于室溫放置1小時(shí),不時(shí)搖動(dòng)。
(3) 用Whatman 1號(hào)濾紙過(guò)濾溶液,丟棄濾液。
(4) 用塑料袋封裝濾紙和活性炭。
注:用次氯酸(漂白劑)處理EB稀釋液并不可取;EB在262℃分解,在標(biāo)準(zhǔn)條件進(jìn)行焚化后不可能再有危害性;Amberlite XAD-16 或活性炭可用于凈化被EB污染的物體表面。
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