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        FAME全自動(dòng)酶免分析對人ELISA試劑盒檢測系統(tǒng)因素分析
        更新時(shí)間:2013-10-28   點(diǎn)擊次數(shù):1000次

                在全自動(dòng)加樣儀的加樣高度設(shè)置中,不斷增加加樣高度,觀察FAME對4個(gè)質(zhì)控血清平行孑L的檢測效果。加樣高度設(shè)置對檢測結(jié)果的影響:在AT plus 2容器參數(shù)編纂過程中,丈量酶標(biāo)板的孔徑和高度,并進(jìn)行加樣定位,確保12根一次性加樣針均在對應(yīng)微孔的中心。因此,有必要對FAME洗液桶進(jìn)行適當(dāng)?shù)乃☆A(yù)溫,使洗液溫度達(dá)到18℃后再用于檢測,人ELISA試劑盒對保證FAME檢測結(jié)果的正確性起重要作用。但經(jīng)進(jìn)一步研究后發(fā)現(xiàn),洗液在較低溫度下(小于14℃),F(xiàn)AME的洗板*減弱,陰性樣本的檢測曲線變寬,嚴(yán)峻脂血樣本可能會(huì)泛起假陽性。觀察檢測結(jié)果是否有假陰性及原始OD值的變異系數(shù)(CV)。在不同溫度的FAME洗液下,對88份正常的無償獻(xiàn)血者血樣進(jìn)行4個(gè)項(xiàng)目檢測,觀察不同溫度的洗液對檢測結(jié)果的影響。樣本選用88份正常的*抗凝的無償獻(xiàn)血者血樣,為降低因試劑造成的誤差,4個(gè)項(xiàng)目在不同洗液溫度下的檢測均采用統(tǒng)一批號(hào)的試劑,于2周內(nèi)完成。

                樣本抗凝方法對檢測結(jié)果的影響:將88份無償獻(xiàn)血者血樣隨機(jī)分為兩組,對照組和實(shí)驗(yàn)組各44份,對照組血樣(m1)和肝素(u)的比例為1:10,實(shí)驗(yàn)組血樣(m1)和肝素(U)的比例為1:2.室溫下,兩組血樣經(jīng)3 000 r/min離心5 min后均有較好的分層,血漿呈液態(tài),肉眼觀察兩組血樣無區(qū)別。近年來,良多采供血機(jī)構(gòu)接踵引進(jìn)了全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA試劑盒)檢測,全自動(dòng)酶免檢測設(shè)備在過程處理的速度、正確性精密度和重復(fù)性方面均優(yōu)于手工操縱。分別在HBsAg、抗一HCV、抗一HIV和TP等4項(xiàng)ELISA檢測項(xiàng)目的酶標(biāo)板上設(shè)空缺對照2孔、陰性對照3孔、陽性對照2孑L、質(zhì)控1孔,其余88孔用于兩組血樣的檢測。方法隨機(jī)選擇對照組和實(shí)驗(yàn)組各44份無償獻(xiàn)血者血樣,分別進(jìn)行兩種不同方式的抗凝,應(yīng)用FAME全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)進(jìn)行HBsAg、抗一HCV、抗一HIV、TP 4個(gè)項(xiàng)目檢測,比較兩組檢測結(jié)果。
                在嚴(yán)寒的冬季,當(dāng)實(shí)驗(yàn)室溫度低于14℃時(shí),即使采取了升溫措施,使實(shí)驗(yàn)室溫度很快達(dá)到預(yù)定的室溫,但洗液溫度的上升會(huì)存在嚴(yán)峻的滯后現(xiàn)象。洗液溫度對檢測結(jié)果的影響:用10℃蒸餾水對濃縮洗滌液進(jìn)行20倍稀釋,充分混勻,待*溶解后加入FAME洗液桶,人ELISA試劑盒并用37℃水浴箱分別對其水浴加熱至14℃、18℃、22℃ 、26℃后用于檢測。探討3種常見的影響全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)檢測結(jié)果的因素,進(jìn)步ELISA試劑盒檢測結(jié)果的正確性。在加樣程序編纂中,加樣步驟及加樣體積按試劑仿單要求進(jìn)行,加樣高度在軟件缺省值(8.1 mm)的基礎(chǔ)上分別增加0.5、1.0、1.5、2.0和2.5 mm。

                    恰當(dāng)?shù)南礈煲簻囟葘ΡWCFAME的洗板效果及檢測結(jié)果的重復(fù)性有重要意義。在無償獻(xiàn)血者標(biāo)本中,經(jīng)常會(huì)有較多的不同程度的脂血樣本,一般以為溶血、脂血樣本對ELISA 檢測結(jié)果影響不大L3 。若檢測結(jié)果為陽性,重新取樣后用相同試劑雙孔復(fù)測,人ELISA試劑盒若雙孔均為陰性,則確定原檢測結(jié)果為假陽性。檢測樣本用4個(gè)室內(nèi)質(zhì)控血清替換,各項(xiàng)試驗(yàn)平行檢測2孔,對照用手工加樣,保證CUT OFF值計(jì)算正確。

        上海通蔚生物科技有限公司

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