大鼠轉移趨化生長因子β1ELISA 檢測試劑盒
本試劑僅供研究使用 標本:血清或血漿
試驗原理:
TGF-Β1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知TGF-Β1濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將TGF-Β1和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TGF-Β1的濃度呈比例關系。
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
大鼠轉移趨化生長因子β1ELISA 檢測試劑盒
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項
1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
大鼠轉移趨化生長因子β1ELISA 檢測試劑盒
樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作步驟
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空轉移趨化生長因子β1孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。
大鼠轉移趨化生長因子β1ELISA 檢測試劑盒
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。
結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的TGF-Β1標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的TGF-Β1含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-400pmol/L
4、敏感度: 1.0 pmol/L
Ethacridine lactate salt 利凡諾 [6402-23-9] 100g
1,2-Ethanedisulfonic acid disodium salt 1,2-乙二磺酸鈉 [5325-43-9] 5g
1,2-Ethanedithiol 1,2-乙二硫醇 [540-63-6] 100ml
Ethanol anhydrous 無水乙醇 [64-17-5] 500ml
Ethanol (95%) 乙醇 (95%) [64-17-5] 500ml
Ethanolamine 乙醇胺 [141-43-5] 500ml
Ethephon 2-氯乙基膦酸 [16672-87-0] 500g
Ethidium bromide 10 mg/ml stock solution 溴化乙錠溶液(10 mg/ml) / 5ml
2-Ethoxybenzaldehyde 鄰乙氧基苯甲醛 [613-69-4] 100g
4-Ethoxybenzaldehyde 對乙氧基苯甲醛 [10031-82-0] 100g
Ethoxybenzene 苯 [103-73-1] 100ml
大鼠轉移趨化生長因子β1ELISA 檢測試劑盒
2-Ethoxybenzoic acid 鄰乙氧基苯甲酸 [134-11-2] 100g
Ethyl acetate 乙酸乙酯 [141-78-6] 500ml
Ethylamine hydrochloride 乙胺鹽酸鹽 [557-66-4] 500g
Ethylbenzene 乙苯 [100-41-4] 500ml
Ethyl benzoate 苯甲酸乙酯 [93-89-0] 500ml
Ethyl carbamate 烏來糖 [51-79-6] 250g
Ethyl bromide 溴乙烷 [74-96-4] 500ml
Ethyl-2-bromopropionate 2-溴丙酸乙酯 [535-11-5] 100ml
2-Ethylbutyric acid 2-乙基丁酸 [88-09-5] 100ml
Ethyl cellulose 乙基纖維素 [9004-57-3] 250g
Famotidine 法莫替丁 [76824-35-6] 100g
Fast blue B salt 固藍 B鹽 [14263-94-6] 5g
G 418 sulfate G418 硫酸鹽 [108321-42-2] 1g
Ethyl chloroacetate 乙酯 [105-39-5] 250ml
Ethyl dodeconoate 月桂酸乙酯 [106-33-2] 250g
Ethylene carbonate 碳酸乙烯酯 [96-49-1] 500g
Ethylenediamine 1,2-乙二胺 [107-15-3] 250ml
Ethylenediamine hydrochloride 乙二胺鹽酸鹽 [333-18-6] 100g
Ethylene glycol 乙二醇 [107-21-1] 250ml
Ethylene glycol diethyl ether 乙二醇二 [629-14-1] 250ml
Ethylene glycol dimethyl ether 乙二醇二甲醚 [110-71-4] 250ml
Ethylene glycol monoethyl ether 乙二醇單 [110-80-5] 500ml
Ethylene glycol monomethyl ether 乙二醇單甲醚 [109-86-4] 250ml
Ethylene glycol monophenyl ether 乙二醇一苯醚 [122-99-6] 250ml
N-Ethylethylenediamine N-乙基乙二胺 [110-72-5] 100g
G 418 sulfate G418 硫酸鹽 [108321-42-2] 100mg
Ethylhexadecyldimethylammonium bromide 十六烷基-二甲基-乙基-溴化銨 [124-03-8] 100g
Ethylhexadecyldimethylammonium bromide 十六烷基-二甲基-乙基-溴化銨 [124-03-8] 500g
Ethylhexadecyldimethylammonium bromide 十六烷基-二甲基-乙基-溴化銨 [124-03-8] 25g
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